1、血清使用时一定需要灭活么?
答:实验显示,经过正确处理的热灭活血清对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有作用,甚至因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。若非必须,可以不需要做热处理这一步。不但节省时间,更确保血清的质量。
2、细胞冷冻培养基的成分是什么?
答:动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含5 - 10%DMSO (dimethyl sulfoxide) 和90 - 95%原来细胞生长用的新鲜培养基均匀混合后的培养基。注意:由于DMSO稀释时会放出大量热能,故不可将DMSO直接加入细胞液中,必须在使用前先行配制完成。
3、细胞培养基偶然被冻,可否继续使用?
答:如果细胞培养基偶然被冻,您应该自然溶解培养基并观察是否有沉淀产生。如果没有沉淀产生,培养基可以正常使用,如果出现沉淀,只能丢弃这些培养基。
4、什么是个性化培养基?它有什么优点?
答:根据细胞类型、培养方式和生产工艺等特点所定制的培养基,即个性化培养基。个性化培养基在国外生物制药企业被普遍采用,个性化培养基可以为细胞生长提供充足的营养物质,能提高细胞的生长速率、培养密度、以及延长细胞维持时间;也可以为细胞生长提供均衡的营养供给,减少细胞有害代谢物质的积累,降低对细胞生长的危害;同时对贴壁细胞而言,能增加细胞的贴壁性,并降低培养过程中剪切力对细胞的损伤;个性化培养基可以根据客户的特殊需求减少或不使用动物源成分,从而使生物制品安全性更有保障。
5、无血清培养与有血清培养使用的抗生素量一样吗?
答:当在无血清培养基中添加抗生素时,降低至少在有血清培养基中所使用浓度的50%。因为血清中的蛋白会结合和灭活一些抗生素。而在无血清培养条件下,抗生素不被灭活。