1. 石蜡切片脱蜡和水化后，用PBS(pH7.4)冲洗三次，每次3分钟（3x3`）。
2. 根据每一种抗体的要求，对组织抗原进行相应的修复。
3. 如果有必要，每张切片加1滴（试剂A）室温下孵育10分钟，以阻断内源性过氧化物酶的活性。
PBS冲洗3x3`。
4. 除去PBS液，每张切片加1滴或50μl的第一抗体(用户自选)，室温下孵育60分钟或4℃
过夜，建议参见每种抗体的说明书。
5. PBS冲洗3x5`。除去PBS液，每张切片加1滴或50μl酶二抗聚合物(试剂B)，室温下孵
育40分钟或37度孵育30分钟或4度过夜。PBS冲洗3x3`。
6. 除去PBS液，每张切片加1滴或50μl新鲜配制的DAB或AEC溶液（详见DAB或AEC使用
说明书），显微镜下观察3-5分钟（DAB）或10分钟（AEC）。
7. 自来水冲洗，苏木素复染，若有必要，可用0.1%HCl分化，自来水冲洗，PBS返蓝。
8. 如果用DAB显色，则切片经梯度酒精脱水干燥，(二甲苯透明)，中性树胶封固；如果
用AEC显色，则切片不能酒精脱水，而直接用水性封片剂。封片。
灏洋生物 15:15:15
名称 ：connexin 43
产品编号 ：CM7269
价格/规格：0.1ml/20ug
技术指标 ：小鼠抗人，大鼠，小鼠 单克隆抗体 Ig分类：IgG2a
适用组织 ：冰冻/石蜡
阳性部位：细胞浆
组织处理：0.1mol枸橼酸缓冲夜-热修复15分钟（95度）
产品说明 ：
产地: Cellscience
二步法（无生物素PV6000系列），
实验步骤使用说明：
试剂盒组成
试剂A: 3% H2O2
试剂B: Polymerized HRP-Anti Mouse或Rabbit IgG 3.0ml/6.0ml/18ml（根据一抗宿主而定）
PV6001（兔）适用于兔来源的一抗
PV6002（小鼠）适用于小鼠来源的一抗
PV6000 (通用型) 适用于兔，小鼠，大鼠来源的一抗
3.0ml- 价格 ￥300.00 / 6.0ml- 价格 ￥580.00 / 18ml- 价格 ￥1780.00
试剂盒规格及贮存条件
规格：3ml（50片）/6ml(120 片)/18ml(360 片)
贮存条件：本试剂盒宜4℃保存，稳定期1 年
免疫组化染色步骤
1. 石蜡切片脱蜡和水化后，用PBS(pH7.4)冲洗三次，每次3分钟（3x3`）。
2. 根据每一种抗体的要求，对组织抗原进行相应的修复。
3. 如果有必要，每张切片加1滴（试剂A）室温下孵育10分钟，以阻断内源性过氧化物酶的活性。
PBS冲洗3x3`。
4. 除去PBS液，每张切片加1滴或50μl的第一抗体(用户自选)，室温下孵育60分钟或4℃
过夜，建议参见每种抗体的说明书。
5. PBS冲洗3x5`。除去PBS液，每张切片加1滴或50μl酶二抗聚合物(试剂B)，室温下孵
育40分钟或37度孵育30分钟或4度过夜。PBS冲洗3x3`。
6. 除去PBS液，每张切片加1滴或50μl新鲜配制的DAB或AEC溶液（详见DAB或AEC使用
说明书），显微镜下观察3-5分钟（DAB）或10分钟（AEC）。
7. 自来水冲洗，苏木素复染，若有必要，可用0.1%HCl分化，自来水冲洗，PBS返蓝。
8. 如果用DAB显色，则切片经梯度酒精脱水干燥，(二甲苯透明)，中性树胶封固；如果
用AEC显色，则切片不能酒精脱水，而直接用水性封片剂。封片。
