1980年，Ames公司推出了第二代血糖仪，Glucometer。第一代的和第二代血糖仪的主要区别为病人无须再冲洗试纸，只需要在反应后将试纸上的血细胞轻轻擦去就可以读数了。虽然第二代血糖仪体积变小而且比较方便病人使用，但是仍然需要采集大约10--15微升的血样，并需要大约1分钟反应时间才能得到结果。随后，Ames公司又相继在1985年和1986年推出了Glucometer2和带有记忆功能的GlucometerM，并于1990年推出较低价位的Glucometer3。
1983年同时期，德国的Boehringer Mannheim（罗氏）公司推出了他们的第一台血糖仪Reflolux。反应时间为2分钟，测量结果非常准确，随后发展出Reflolux2，2M和S。Reflolux在80年代末期取代了Ames公司的Glucometer成为市场上的领导品牌，Reflolux S是当时最成功的第二代血糖仪。
1981年美国Lifescan（强生）公司推出该公司的第一台血糖仪GlucoScan。随后相继有1983年的GluscoScan Plus以及1985年的GlucoScan2000/3000。在当时Lifescan公司只占据血糖仪市场很小的份额。
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