1细胞冷冻培养基的成分有哪些？
答：动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含9-10%DMSO(dimethylsulfoxide)和90-95 %原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成。
2细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？
答：冷冻管内细胞数目一般为1-8×106 cells/ml vial。
3如何用台盼兰计数活细胞？
答：将样品适当稀释后，用稀释后的样品和0.4％的台盼兰溶液按1:1混合后，用移液枪点样到血球计数板，置于倒置显微镜下观察、计数，其中蓝色细胞是死细胞，因活细胞排斥台盼兰，不被染色。
4冷冻管应如何解冻？
答：取出冷冻管后，须立即放入37℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1－2分钟内大部分融化，特别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用75％消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂。
5细胞冷冻管解冻培养时，是否应马上去除DMSO？
答：除少数特别注明对DMSO敏感之细胞外，绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞），在解冻之后，应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养方瓶中，待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO即可，如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。
6培养细胞时应使用5%还是10%CO2，或者根本没有影响？
答：一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作为pH的缓冲系统，而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中NaHCO3含量为每公升3.7g时，细胞培养时应使用10%CO2；当培养基中NaHCO3为每公升1.5g 时，则应使用5%CO2培养细胞
